肉的宰后嫩化一般归因于肌原弹性棉纤维板设计的受到破坏，肌原弹性棉纤维板设计是由内源性蛋清淀粉核高蛋白水解酶光挥发肌原弹性棉纤维板和神经元系骨架蛋清构成的。与十多年来一致是的关注关键性的钙蛋清酶有所不同，胱天蛋清酶（caspases）在最近这一段时间变成 感关注的题。胱天蛋清酶在神经元系凋亡的进行的阶段起着至关首要的使用，另外caspase-3在人死了蛋清淀粉核高蛋白水解中的使用是双角度和繁杂的，为此就能够进的一步科学探析。S-亚硝基化经由的就能够缓解钙尽情释放、动能排泄、蛋清质光挥发和神经元系凋亡来的就能够缓解口感，还包括嫩度和持水技能。后期科学探析得知S-亚硝基化就能够降低忽略线粒体的caspase-3级联的反应，这可能性是腹肌神经元系凋亡和羊肉高质量转化的主要原因。caspase-3的科学探析关键性是其与神经元系凋亡的干系，当然，较少有科学探析探究S-亚硝基化的就能够缓解caspase-3的制度。

2024年9月由常州畜牧业高中张万刚专家教授团对在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱海洋生物为该研究提供了亚硝基化掩盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文名版头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

学术期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2021年决定因素：5.7

公布时间段：2024年9月

企业客户方：南京农业大学

深入分析食材：蛋白

拜谱具备能力：亚硝基化修饰组学

高技术行车路线：

一、研发但是

01.Caspase-3渗透性

目前为止尚不了解NO对caspase-3的抑生产用用途要不要归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样氨水浓度等度的GSNO有所作为外源性NO批售，以成脂caspase-3的体内S-亚硝基化。可是取决于，与不会有GSNO的组相较于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力性氧明显缩减（图1），与前者简报同步。GSNO治理 缩减caspase-3活力性氧的内在的主要原因仍亟待体现了。

图1 各个有机废气浓度的GSNO补救对caspase-3亲水性的的影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化情况

论述Caspase-3的亚硝基化程度上上，以指出GSNO对Caspase-3的造成反应性。经GSNO治疗后，检查测量到caspase-3血清S-亚硝基化程度上增多（图2）。这样的同时揭示，外源性GSNO培育可成就 帮助caspase-3的身体S-亚硝基化。可笑震惊的是，在不会GSNO存在的的比较组中检查测量到是一个不大的S-亚硝基化带，这揭示caspase-3很有可能造成内源性的S-亚硝基化。还有，本论述中caspase-3的S-亚硝基化程度上上较高，而caspase-3的渗透性大大减少，这与先前的论述相同。同时，caspase-3的特情人S-亚硝基化体现位点尚不知晓，还可以进一步明确一个脚印的经历。

图2 GSNO处里对caspase-3S-亚硝基化总体水平的影响到

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化突显组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码回文序列。红颜色标志的编码回文序列写出S-亚硝基化肽，红颜色标志的C写出S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3光降解结核蛋白

结核球核淀粉酶酶用于这种最至关重要的组织神经元骨架核球核淀粉酶酶，在保护肌组织神经元构造的构造完成篇性和做收缩性管理方面起着最至关重要用途，研究方案S-亚硝基化caspase-3对结核球核淀粉酶酶分解的过敏性兼备最至关重要真正意义。与Std（未用胱天核球核淀粉酶酶酶-3和GSNO孵育的默认值肌玻纤核球核淀粉酶酶）组比较，0 μM GSNO组（肌原玻纤和caspase-3的孵育，无GSNO）的完成篇结核球核淀粉酶酶横向可观减轻，提示卡caspase-3对结核球核淀粉酶酶兼备不确定性的核球核淀粉酶酶水解反应意识。在GSNO孵育后，完成篇结核球核淀粉酶酶的横向很大新增（P < 0.05）。不仅，当GSNO氧化还原电位上升时，完成篇结核球核淀粉酶酶的横向定期调涨（P < 0.05）（图5）。这个找到体现了，SNO修饰语的caspase-3以横向依赖性的方试能够抑制结核球核淀粉酶酶的分解。

图5.S-亚硝基化caspase-3化学降解结蛋清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3吸附肌钙蛋清-T

肌钙淀粉酶-T (TnT)是原肌球淀粉酶调高有担当胸肌做收缩的细条的必不可少肌原食物仟维淀粉酶。TnT的光挥发特色是加测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化意识下，caspase-3对TnT的光挥发的情况图甲6如图，与Std组（中含caspase-3和GSNO的肌原食物仟维）不同于，caspase-3组中30 kDa TnT段落为重要加入，证实caspase-3参加了TnT的光挥发，然而，caspase-3与GSNO的孵育会造成 30 kDa TnT消减。在100和200 μM GSNO组彼此并没有加测到比较明显的异同(P > 0.05)，而当GSNO的盐浓度提升400 μM 时，该段落为重要缩减(P < 0.05)。这样遇到证实了SNO掩盖的caspase-3对TnT光挥发的需要抑加工用。结淀粉酶和TnT是caspase-3的特别敏感底物，而GSNO工作消减caspase-3的亲水性机会会造成 肌原食物仟维淀粉酶光挥发度消减。由此可见说明，NO引诱的S-亚硝基化需要在掩盖半胱氨酸残基来调高caspase-3的亲水性，转而进一部会损害其对结淀粉酶和TnT的淀粉酶蛋白质水解意识，导致会损害牛肉片产品。

图6. S-亚硝基化caspase- 3可降解肌钙淀粉酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本设计我委浅析S-亚硝基化对caspase-3绘制语的会引响和紧接着对羊肉肌原化学纤维材料体内分解的会引响。球淀粉酶S-亚硝基化应该绘制语caspase-3的半胱氨酸残基，最终得以引致caspase-3灵活性变低，进第一步促使了其对羊肉肌原化学纤维材料球淀粉酶的球淀粉酶油脂水解程度。

三、拜谱个人总结

学习按照了酶活检验，亚硝基化呈现组学剖析，WB等检查的方法，看见血清S-亚硝基化能否呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这产生了caspase-3活性氧的减小，齐头并进一歩克制了其对羊肉肌原化学纤维血清的血清水解反应力量。本学习为释意血清质亚硝基化对肉质地的调空体制具备新一个新的层面。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、表达血清质组学、排泄组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系统产品的，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total阳极氧化替换、游离于巯基，欢迎大家咨询！

参考选取专著：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663